99% 的人不知道的 PCR 耗材小机密!

PCR板通常采用96孔和384孔的形式,其次为24孔和48孔。使用的PCR仪和正在进行的应用的性质将决定PCR板是否适合您的实验。

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(相关资料图)

裙边

PCR板的“裙”是板周围的板。裙边可为反应体系构建时的移液过程提供较好的稳定性,以及在进行自动机械处理时提供更好的机械强度。PCR平板可分为无裙边,半裙边和全裙边。

无裙边板缺少周围的面板(图 A)。这种形式的反应板可与绝大多数PCR 仪和实时PCR仪的模块适配,但不适用于自动化应用。

半裙边板在板的边缘周围具有短的边缘(图 B),在移液过程中提供足够的支撑。

全裙边的PCR板具有覆盖板高度的边缘面板(图 C)。这种板形式适用于具有突出模块的PCR仪(可有利于自动化操作),可安全稳固适配。全裙边还增强了机械强度,使其非常适合在自动化工作流程中使用机器人平台。

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板面

板的板面是指其上表面。全平面板设计适用大多数PCR仪,便于密封和处理。

边缘凸起板设计对于某些PCR仪器具有最佳适配性,有助于在不需要适配器的情况下平衡热盖压力,确保最佳的的热传递和可靠的实验结果。

具有全平面板和凸起边缘的 PCR 板

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颜色

PCR板通常可提供多种不同的颜色形式,以便于对于样品的视觉区分和鉴别,特别是在高通量实验中。尽管塑料的颜色对DNA扩增没有影响,但在设置实时荧光定量PCR的反应时,与透明耗材相比,我们更推荐使用白色塑料耗材或者经磨砂处理的塑料耗材,以实现灵敏和准确的荧光检测。

qPCR使用透明和白色耗材的结果比较(A)与透明孔相比,白色孔Ct值更低(灵敏度更高)。(B)白色孔在技术重复中也表现出更高的一致性。

白色耗材通过阻止荧光折射出管来提高qPCR数据的灵敏度和一致性。折射被最小化时,更多的信号被反射回检测器,从而增加信噪比。此外,白色管壁可阻止荧光信号传递至PCR仪模块,避免被吸收或不一致地反射荧光信号,从而使重复实验中的差异降至最低。

不同品牌仪器,由于荧光检测器位置设计不同,请参考生产厂家推荐的耗材。通常AppliedBiosystemsPCR仪,我们推荐您使用原装的磨砂孔PCR 板,这些耗材经过研发严格测试,可确保您获得准确可靠的实验数据。而对于Bio-RadCFX或Roche480 荧光定量PCR仪,厂家推荐使用白色PCR 板。

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外形

PCR板的外形是指其高度,因此“low profile(低容,低位)”意味着高度更低。低容耗材更短的设计最大程度减少了反应体系上方的空间,降低了蒸发的影响并提高了热传导效率。因此,同时兼容的情况下推荐优先选择低容耗材,即“快速”板或矮板。

标准和低容 PCR 耗材

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切角

切角是对PCR板的一个角缺失,取决于所需要适配的仪器。切角可能位于 96孔板的H1,H12或A12位置,或384孔板的A24位置。

带有切角的 PCR 板

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ANSI/SBS 形式

为了兼容不同的自动化液体处理高通量系统,PCR板应符合美国国家标准协会(ANSI )和生物分子科学学会(SBS,现属实验室自动化和筛选协会( SLAS))。符合 ANSI/SBS的板具有标准的尺寸,高度,孔位置等,因而有助于于自动化处理。

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孔边缘

PCR板的共同特点是在孔周围有一个凸起的边缘。该设计可有助于用封板膜进行密封以防止蒸发。

PCR 板凸起的孔边缘。

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标记

PCR板上的字母数字标记将有助于识别单个孔及对应样品的位置。通常为白色或黑色字迹的凸起字母,以便于查看。

然而,在自动化流程中凸起的标记可能会干扰到密封的过程。对于自动化应用,刻字 (下图 )可以改善板的外边缘的密封性。

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可分割板

某些96 孔PCR板被设计成可分割的。该设计使得一整块96孔板可以轻松被分割成更小的板,在不需要使用一整块板时可减少耗材的浪费并降低成本。具有 24 孔分割的平板是最常见的,但32孔和8孔分割也可以提供方便和灵活性。

可分割的 PCR 板

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条形码

在高通量实验中,半裙边和全裙边的PCR板可以标记条形码,以便于记录和跟踪。

为了更为安全可靠地追踪,条形码标记应当不能被刮掉并能承受化学侵蚀和一定的温度范围(如 –196°C 至 120°C)。条形码阅读器的位置可能因自动化平台而异,在这些情况下,4边条形码或自定义条码是替代解决方案。

条形码(A)带有条形码的 PCR 板。(B)常见的条码格式。

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